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牡丹油体提取及其稳定性研究(3)
图6 不同糖浓度条件下油体的稳定性
3 讨论
本研究采用分级法和优化法对牡丹种子中油体进行提取,随后对油体的外观、提取率、显微结构、4 ℃储存两周后稳定性和油体蛋白组成等指标进行比较,最终确定了优化法更加适合牡丹油体的提取。单从外观来看,两种方法提取的油体均呈透明状态,差异不大,但分级法提取的油体透明度更高,这可能是由于其在提取过程中的多步的清洗所致。而就提取率而言,优化法的提取率更高,达到22.63%,这主要是由于优化法步骤简单使得油体提取损耗大大降低,而分级法的多步清洗导致油体提取的回收损耗增加。在SDS-PAGE电泳检测油体蛋白的结果中,优化法提取油体的条带颜色较深,这可能是由于分级法操作中在去除杂蛋白的同时也对油体蛋白产生了一定的影响,因此优化法提取的油体蛋白含量要高于分级法,这也可能是优化法的油体提取率要高于分级法的原因。此外,在4 ℃储存两周后经显微观察可知,分级法提取的油体出现了大幅度的聚合和皱缩,而优化法提取的油体依旧大小均一、分布均匀,具有较好的稳定性。
油体的稳定性是由其表面的油体蛋白决定的,油体表面存在电荷,当离油体蛋白等电点较近时,油体表面的静电荷接近于零,油体之间会因静电聚合作用而发生聚集,从而导致油体粒径增大,形状不规则;反之油体不发生聚集,具有较好的稳定性[7]。而油体的稳定性容易受到外界环境的影响,例如温度、pH值、NaCl和糖浓度等[18]。本研究的结果显示,温度对于牡丹油体的影响不大,在50、70、90 ℃条件下,油体均能保持相对稳定,这与花生油体稳定性的研究结果相一致[19]。有研究推测,油体上的油体蛋白与TAG形成“发卡结构”[20],在外界温度条件升高时,油体蛋白的头部伸入到TAG内部而免受破坏,因此油体在温度变化的条件下依旧能保持较好的稳定性。高红桃等[7]关于亚麻芥种子油体的稳定性研究表明,油体本身带负电荷,以偏碱性的条件处理会使静电荷量增加,油体之间因斥力较大而能保持平衡且不发生聚集,相反,在酸性及中性条件下,油体之间因斥力小而容易出现聚集甚至破裂的现象,使其粒径变大。本研究也证实了pH的变化对牡丹油体的稳定性有一定的影响。当pH≥9.0时,牡丹油体稳定分布;pH≤7.0时牡丹油体稳定性被破坏,尤其是当pH为5.0时,油体粒径显著增大;7.0 本研究通过比较确定了优化法为适合牡丹油体提取的方法,并从温度、pH值、NaCl和糖浓度等几个因素其研究油体的稳定性,通过对牡丹油体性质的研究,充分了解和利用牡丹籽油中各类脂肪酸的功能、特性,挖掘牡丹油体在食品、药品、化妆品和个人护理产品等不同领域的应用需求价值。 4 结论 通过对两种牡丹油体提取方法的比较研究,得出优化法更适宜于牡丹油体的提取。在牡丹油体的稳定性研究中,温度、pH值、NaCl和糖浓度对其影响不一,即:温度对牡丹油体的稳定性影响不大,牡丹油体在中性和酸性条件下(pH≤7.0)稳定性容易受到破坏,牡丹油体在低浓度的NaCl(50 mmol/L)和糖(25 mmol/L)条件下能够表现稳定。 [1]TZEN J T C, LIE G C, HUANG A H C. Characterization of the charged components and their topology on the surface of plant seed oil bodies[J]. Journal of Biological Chemistry, 1992, 267(22): - [2] MURPHY D J. The dynamic roles of intracellular lipid droplets: from archaea to mammals [J]. Protoplasma. 2012, 249(3): 541-585 [3] 胡佳, 刘春林. 植物油体研究进展[J]. 植物学报, 2017, 52(5): 669-679 HU Jia, LIU Chunlin. Advances in research on plant oil body [J]. Chinese Journal of Plant Science, 2017, 52(5): 669-679 文章来源:《牡丹》 网址: http://www.mdzzs.cn/qikandaodu/2021/0415/1697.html
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